虫草素对胰腺癌BxPc-3、BxPc3-LN5细胞株增殖抑制作用的研究

虫草素对胰腺癌BxPc-3、BxPc3-LN5细胞株增殖抑制作用的研究

许文彦 ¹ 龙江¹唐亮² 吴明生 ² 张倩 ² 倪泉兴¹虞先濬¹

(1.复旦大学附属肿瘤医院，上海200032；

2.上海国宝企业发展中心，上海 200001)

【摘要】 目的 研究虫草素对胰腺癌细胞株BxPc-3 及其传代高转移潜能细胞株BxPc3-LN5 的生长抑制作用，为虫草素是否可用于胰腺癌临床化疗进行理论探讨。方法 应用四甲基噻唑蓝比色法（MTT比色法）对虫草素诱导的人胰腺癌BxPc-3, BxPc3-LN5细胞株进行检测和观察。结果 虫草素均对于BxPc-3，BxPc3-LN5 细胞株有抑制效果。结论 虫草素对BxPc-3及BxPc3-LN5的细胞毒作用在一定范围内呈剂量和时间依赖关系。

       胰腺癌是一种较常见的恶性肿瘤。在我国胰腺癌的发病率也有逐年增多趋势，90%的患者在诊断后1年内死亡，1年生存率仅为1%～3%。药物治疗是重要的治疗手段之一，它能明显延长患者的生存时间，提高患者的生存质量。虫草素即3-脱氧腺苷（3- deoxyadenosine），为含氮配糖体的核酸衍生物，属嘌呤类生物碱，是一种核苷类抗生素，最早由Cunningham于1951年在蛹虫草（Cordyceps militaris）原浆液中分离得到，该成分后被证实为我国中草药冬虫夏草（Cordyceps sinensis）的有效成分。分子式为C₁₀H₁₃N₅O₃，相对分子质量为251，熔点为230～231℃，溶于水、热乙醇和甲醇，不溶于苯、乙醚和氯仿，紫外光的最大吸收波长为259nm。研究证明虫草素能抑制mRNA合成，诱导肿瘤细胞凋亡，使细胞分化，从而对多种肿瘤细胞的生长有抑制作用。本文采用四甲基噻唑蓝比色法（MTT比色法）研究虫草素对胰腺癌细胞株BxPc3、BxPc3- LN5 的生长抑制作用，为虫草素是否可用于胰腺癌临床化疗进行理论探讨。

       近年来，尽管胰腺癌分子水平研究取得了显著进步，但5年生存率仍没有显著提高，较晚出现的临床症状、较低的手术切除率、较高的术后复发率以及对放化疗不敏感是造成这一状况的主要原因。在胰腺癌的治疗方面，除了传统的手术、放疗与化疗，又出现了基因干扰和靶向治疗，使胰腺癌的防治工作有了突破性进展。同时应用中药进行综合调节治疗胰腺癌也成为近年研究的热点领域，中药复方或单味中药提取的有效成分在抑制肿瘤细胞增殖、侵袭、转移和诱导肿瘤细胞分化，促进凋亡以及逆转肿瘤细胞多药耐药、减毒增效等方面也有其独到的优势。

      早在20世纪70年代就已发现虫草素具有抗肿瘤作用。目前现有的体内及体外实验认为虫草素抗肿瘤的机制是多方面的，主要是抑制DNA、RNA、蛋白质的合成，降低c- myc基因的mRNA 表达，并可增强放疗及某些化疗药物的敏感性；并因其半衰期短，可联合腺苷脱氨酶抑制剂或羟基脲增加疗效；同时其可增强NK 细胞对肿瘤细胞的杀伤力，有免疫调节的作用。

       虫草素已被证实对艾氏腹水癌、人鼻咽癌KB 细胞和人宫颈癌HeLa细胞等皆具有明显的抑制作用，对KB细胞的最低致毒质量浓度为（10～25）g/mL。Nakamura 等报道，虫草素通过激发肿瘤细胞中腺嘌呤核苷A3 受体，可以抑制小鼠B16- BL6 黑素瘤细胞和Lewis 肺癌细胞的生长。但在胰腺癌方面，国内外未见报道。本研究结果显示，虫草素可以抑制胰腺癌BxPC3 细胞株及其高转移潜能细胞株BxPC3- LN5 的增殖。

      根据药物量效反应曲线（dose- response curve），大多数抗癌药物在一定范围内其细胞杀伤作用有浓度依赖性，局部（准确地说是细胞内）药物浓度增加一倍杀灭细胞数可增加10 倍左右。本次MTT 比色法结果显示，胰腺癌BxPc3、BxPc3- LN5 细胞株对虫草素的作用都有较强的敏感性，随着虫草素浓度的增加以及作用时间的延长，细胞增殖抑制率出现明显增加。表明虫草素及其水提物对BxPc3 及BxPc3- LN5 的细胞毒作用在一定范围内呈剂量和时间依赖关系。目前，国内尚未见应用虫草素进行胰腺癌治疗的实验研究。我们本次实验发现，它具有明显抑制胰腺癌细胞株增殖的作用，显示出良好的对抗胰腺癌细胞效应，但虫草素产生的治疗胰腺癌的生物学效应的机制还有待进一步研究。

（摘自：《中国医药科学》2011年第一卷第7期: 14-16）